Test ten jest oparty na oznaczeniu trzech parametrów hormonalnych w surowicy krwi ciężarnej (AFP, b-HCG i estriol). Według rekomendacji, badanie jest najbardziej czułe jeżeli jest wykonywane pomiędzy 16 a 18 tygodniem, natomiast jest możliwe wykonanie testu pomiędzy 15 a 20 tygodniem ciąży.